телефон горячей линии
8-800-200-86-86

Как определяют степень фрагментации ДНК сперматозоидов: обзор тестов

Как определяют степень фрагментации ДНК сперматозоидов: обзор тестов

Как определяют степень фрагментации ДНК сперматозоидов: обзор тестов

Спермограмма – не единственный анализ, который может назначить врач мужчине при подготовке к зачатию. Нередко при нормальных показателях спермограммы рекомендуют сделать тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов.

С его помощью медики определяют качество генетического материала, от которого тоже во многом зависит вероятность зачатия и вынашивания беременности. Особенно часто это исследование назначают при выкидышах у партнерши на ранних сроках.

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов

Каждый сперматозоид несет в себе генетическую информацию. Информация эта хранится в молекуле ДНК, внешний вид которой хорошо знаком даже тем, кто не сильно интересуется биологией и генетикой: две спирально закрученные нити или цепочки.

Если по какой-либо причине в сперматозоиде одна или обе цепочки ДНК повреждены (порваны), он внешне остается нормальным, сохраняет подвижность и жизнеспособность, но при этом либо в принципе не может оплодотворить яйцеклетку, либо эмбрион развивается неправильно. Такие разрывы ДНК называют дефрагментацией или фрагментацией. Их нельзя определить во время анализа спермограммы, т.к. для этого надо «заглянуть» внутрь сперматозоида.

Наиболее частая причина фрагментации ДНК – повреждение ее свободными радикалами. Поэтому так опасна ситуация, когда свободных радикалов накапливается слишком много, возникает так называемый окислительный стресс.

Какие факторы приводят к накоплению свободных радикалов и окислительному стрессу?

  • Работа с вредными веществами.
  • Длительное воздействие электромагнитных излучений.
  • Хронические воспалительные заболевания.
  • Курение.
  • Загрязненный воздух.
  • Вдыхание выхлопных газов.
  • Лишний вес
  • Частый перегрев паха.
  • Пища с большим количеством консервантов, усилителей вкуса.
  • Малое количество антиоксидантов в пище.

Последствия фрагментации ДНК сперматозоидов

Самое серьезное последствие фрагментации ДНК сперматозоидов – выкидыш. Дело в том, что сперматозоиды с поврежденной ДНК могут сохранять способность к оплодотворению, но из-за неполноценного генетического материала эмбрион не может нормально развиваться и погибает на ранних сроках беременности, либо же из-за накопленных дефектов развития отторгается организмом матери. Также из-за фрагментации ДНК в принципе снижаются шансы на зачатие как естественным путем, так и при помощи ЭКО.

Какие бывают тесты на фрагментацию ДНК сперматозоидов?

Методы определения разрывов ДНК с точки зрения обычного человека, не врача и не ученого, очень похожи. Эякулят обрабатывают специальным образом, чтобы под микроскопом подсвечивались поврежденные или наоборот целые цепочки ДНК. Затем подсчитывают количество тех и других.

Чаще всего используют методы TUNEL, SCSA и SCD.

  • TUNEL (Transferase mediated dUTP Nick End Labeling).
  • Наиболее популярный метод, преимущество которого в том, что он определяет и одноцепочечные, и двуцепочечные разрывы. За счет этого точностью теста очень высокая.

    В образец спермы добавляют специальное вещество (терминальную трансферазу), которое связывается с «порванными» участками ДНК и краситель. Подсчет идет под люминесцентным микроскопом. Зеленым цветом подсвечиваются сперматозоиды с фрагментацией, красным – с целыми ДНК.

  • Метод SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay)
  • Самый первый метод для определения степени дефрагментации по-прежнему активно используется, потому что обладает достаточной для медицинских исследований точностью. Его также называют определением структуры хроматина по Эвенсону.

    В образец добавляют сначала кислый денатурирующий раствор, который заставляет спирали «развернуться», а затем оранжевый краситель. При связывании красителя с целой ДНК наблюдается зеленое свечение, с незначительно поврежденными – желтое, а с разрывами – красное. Количество всех трех видов считается с помощью лазерного луча, по-разному реагирующего на разное свечение молекул.

  • Метод SCD (Sperm Chromatin Dispersion) или его модификация Halosperm (HALO тест)
  • Популярный, потому что простой тест: для его проведения используется обычный световой микроскоп. Точность метода недостаточна для научных исследований и в целом ниже, чем у двух предыдущих методов. Однако для медицинских исследований он подходит.

    Образец спермы обрабатывают раствором кислоты и точно так же, как в предыдущих, добавляют специальный краситель. Второе название «Halosperm» метод получил, потому что под микроскопом у сперматозоидов с целыми ДНК виден заметный ореол-свечение, так называемый гало-эффект. У сперматозоидов с поврежденной ДНК ореола нет или он очень слабый.

  • Другие методы
  • В научных статьях часто упоминаются такие методы, как COMET (Single-cell gel electrophoresis assay, гель-электрофорез единичных клеток) и NT (ник-трансляции, ISNT, In-Situ Nick Translation assay), но для медицинских исследований они не используются, так как являются слишком сложными и требуют дорогостоящей аппаратуры.

    Какой тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов выбрать?

    Простой ответ – любой. В отдельных случаях выбор метода действительно важен для точной диагностики, и врач-андролог обязательно об этом скажет. В остальных случаях можно смело руководствоваться ценой и доступностью, то есть ориентироваться на тот метод, который делают в клинике или ближайшей лаборатории.

    Результаты теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов: что они означают?

    Какое-то количество сперматозоидов с поврежденной ДНК есть в сперме даже самого здорового мужчины. Поэтому во время теста считают не абсолютное количество сперматозоидов, а отношение количества поврежденных к нормальным. Этот показатель называется степенью фрагментации (или степенью дефрагментации) ДНК сперматозоидов. Его измеряют в процентах.

    О чем говорят результаты теста?

  • Степень фрагментации меньше 15 % – это норма. В этом случае сперматозоидов с поврежденной ДНК мало, лечения не требуется, шансы на зачатие ребенка естественным путем высокие.
  • 15-30 % – это средняя степень дефрагментации ДНК сперматозоидов. Снижены шансы на естественное оплодотворение, вероятность выкидышей повышается.
  • Больше 30 % – высокая степень дефрагментации. Естественная беременность практически невозможна, да и успех ЭКО под вопросом.
  • Можно ли «починить» ДНК сперматозоидов?

    Разорванную цепочку «склеить» нельзя, но можно уменьшить количество свободных радикалов, разрушающих ДНК, что создаст более здоровые условия для созревания новых сперматозоидов. Если выполнять приведенные ниже правила на протяжении трех месяцев (полный цикл созревания сперматозоидов), то есть хорошие шансы, что среди них будет мало поврежденных.

    Итак, что надо делать, чтобы снизить степень фрагментации ДНК сперматозоидов?

  • Принимайте антиоксиданты
  • Антиоксиданты – это те вещества, которые обезвреживают свободные радикалы, держат их под контролем. Особенно хорошо в репродуктивной системе работают коэнзим Q10, бета-каротин, ликопин, витамин C, рутин, витамин Е. Эти шесть мощных антиоксидантов входят в состав препарата Синергин. Доказано, что трехмесячный прием Синергина снижает степень дефрагментации ДНК сперматозоидов до нормальных значений.

  • Осмотрительно пользуйтесь гаджетами
  • Постарайтесь запомнить, что область паха следует беречь от вредных воздействий, особенно от тех, которые не видны невооруженным взглядом. Не ставьте ноутбук на колени, не используйте электромассажеры. Постарайтесь меньше времени проводить рядом с источниками электромагнитных излучений.

  • Дышите чистым воздухом
  • Откажитесь от курения, в том числе от пассивного. Если вы живете в большом городе или рядом с железной дорогой, промышленными предприятиями, поставьте дома очистители воздуха. Постарайтесь в эти три месяца не заниматься ремонтом, не использовать краски и лаки, не контактировать с удобрениями, пестицидами и другими вредными веществами. По возможности, проводите больше времени на свежем воздухе.

  • Лечите хронические болезни воспалительной природы
  • Попробуйте «погасить» очаги хронической инфекции (кариес, насморк и т.д.), даже если вам кажется, что они находятся слишком далеко от области паха. Дело в том, что выработка свободных радикалов – один из способов организма справиться с воспалением. Очаг хронической инфекции – постоянный сигнал к выработке свободных радикалов.

    Все рекомендации, как уже упоминалось, необходимо соблюдать 3-4 месяца.

    С нарушениями в ДНК сперматозоидов может столкнуться каждый мужчина, ведь в современном мире довольно сложно постоянно следить за своим здоровьем, а на многие факторы мы в принципе не в силах повлиять. К счастью, в большинстве случаев проблему можно решить. Главное – точная диагностика и современная терапия.

    НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕКЛАМОЙ. МАТЕРИАЛ ПОДГОТОВЛЕН ПРИ УЧАСТИИ ЭКСПЕРТОВ.

    Источник изображений на данной странице – Shutterstock / Fotodom.